中文摘要：

肾小球系膜增殖标志物是无创性诊断系膜增殖程度的重要指标，也是实施系膜增殖性肾炎个体化治疗的重要依据。本课题通过高通量的多肽组学技术，在大鼠系膜增殖模型的血清中寻找肾小球系膜增殖相关多肽，并进行初步的验证。制备大鼠系膜增殖模型，分为5 组对照组、系膜增殖5天、7天组、系膜增殖恢复10天、14天组。Seldi-Tof技术检测各组血清中的多肽，利用统计学方法寻找与系膜增殖密切相关的2-4个差异多肽。制备差异多肽的抗体以用于体内和体外实验，Western blot技术检测各组血清及肾组织中多肽含量；质粒转染和siRNA干扰技术研究多肽源蛋白质与系膜细胞增殖的关系。选取Lee 氏病理分级Ⅰ-Ⅴ级的5组IgA患者各20例，20例正常人作为对照，ELISA方法检测各组血清中系膜增殖相关多肽的含量，利用统计学方法测定利用多肽诊断系膜增殖的准确度和灵敏度，最终确定可能的系膜增殖生物标志物。

结论摘要：

系膜增生性肾小球肾炎，包括IgA肾病和非IgA系膜增生性肾炎，是肾脏病发病的最主要的病因之一，其已经成为了慢性肾脏病和慢性肾衰及尿毒症的主要原发病。在系膜增生性肾小球肾炎的治疗中，由于缺乏系膜增殖标志物，临床上无法对病人系膜增殖程度进行实时、准确的判断，从而影响临床制定个体化方案。本研究重点研究系膜增殖性肾炎血清中的生物标志物，并初步阐明其作用机制。利用抗Thy-1抗体制备大鼠系膜增殖性肾炎模型，在注射抗体第3天，出现系膜溶解和系膜细胞凋亡；在第5天，系膜细胞开始增殖，并出现细胞外基质积聚；在第7天时，系膜增殖达到高峰。在第14天时，系膜增殖开始恢复，系膜细胞数量减少。收集上述时间点的血清，分别利用3种方法寻找生物标志，即利用SELDI-TOF寻找血清中生物标志物，利用LC-MS 寻找血清中生物学标志和通过肾脏差异表达谱，寻找血清生物标志物。通过这些技术，我们成功的找到了与系膜增殖相关的差异蛋白质，这些蛋白质在系膜增殖期显著变化，而在系膜增殖恢复期恢复，它们的功能与炎症、免疫、细胞骨架相关，主要包括beta-2-微球蛋白, BET1,CD52，kallistatin, 胎球蛋白B, serotransferrin,补体C3，CAPZA2, ANXA2，FHL2, SEPT2，PDLIM1。在众多的候选标志物中，我们发现，SEPT2表达变化与系膜增殖程度变化相关。在抗Thy-1肾炎模型的系膜增殖期，SEPT2在系膜细胞和血清中都低表达，而在系膜增殖恢复期中，SEPT2在系膜细胞和血清中表达均逐渐恢复。而后，我们利用细胞生物学研究SEPT2的作用。发现SEPT2低表达，可以通过p-ERK和p-AKT诱导系膜细胞凋亡，这是SEPT2新的功能的发现。由此，我们证明在抗Thy-1肾炎模型中，SEPT2低表达诱导凋亡，与系膜增殖负调控相关，且其血清中变化可以反映其在系膜细胞中的表达变化。这些结果支持了SEPT2可以作为潜在的系膜增殖标志物。通过本研究，初步找到了系膜增殖性肾炎模型中血清中的差异蛋白质，并筛选出了SEPT2作为潜在的系膜增殖标志物，为日后临床应用开发建立研究基础。