生化研究表明,组蛋白存在乙酰化、甲基化、磷酸化等多种修饰,这些修饰可调整染色质结构,从而调控基因表达。H2B的氧化修饰是一种新发现的组蛋白修饰方式。我们的前期研究表明,在冷驯化过程中,柑橘组蛋白H2B会发生氧化修饰,这种氧化修饰介导了柑橘的抗冻反应。但目前组蛋白的氧化修饰机理尚不清楚。本项目拟选择介导氧化修饰的蛋白为中心,应用免疫共沉淀技术(Co-IP)获取与H2B互作的蛋白,再应用iTRAQ标记结合LC-MS/MS分析蛋白样品,结合生物信息学分析筛选和分离氧化修饰相关的关键基因,通过基因克隆、表达验证及功能分析予以确认,从而鉴定组蛋白H2B氧化修饰关键基因,解析组蛋白H2B氧化修饰的分子基础。 本项目的完成可鉴定和克隆柑橘H2B氧化修饰关键基因,为培育抗冻农作物品种的分子育种提供新基因,为解析H2B氧化修饰介导的抗冻反应的分子机理奠定基础,对探讨抗冻转录调控机制具有重要意义。
英文主题词histone;oxidative modification;MLP2-1;freezing resistance;molecular basis