本项目通过构建花鳗鲡脑cDNA文库,克隆得到了花鳗鲡促性腺激素释放激素、促性腺激素cDNA,并分析了它们在雌雄鱼中的组织表达模式。研究了养殖花鳗鲡性腺发育状况,并检测促性腺激素释放激素、促性腺激素mRNA表达水平以及血清LH和性类固醇激素浓度的季节变化;构建了花鳗鲡GtH的酵母表达载体并转化进入毕赤酵母细胞X33。通过ZeocinTM (500μg/ml) 的YPDS平板筛选得到转化子进行诱导表达。SDS-PAGE 和Western Blot的结果显示,经过诱导4天后挑取的克隆都有胞内可溶性的GtH表达。成功地利用外源激素诱导养殖花鳗鲡性腺发育成熟,并研究了人工催熟过程中花鳗鲡性腺发育的组织形态学特征。在人工催熟过程中,雌雄花鳗鲡脑mGnRH mRNA的表达水平显著升高,而cGnRH-II mRNA的表达水平没有显著变化。脑垂体GTHα和LHβ mRNA 的表达随着性腺的发育成熟显著升高;相反,FSHβ mRNA 的表达水平明显下降。本项目建立了花鳗鲡的人工催熟技术,并分析人工催熟过程中花鳗鲡的生殖内分泌特征,为今后花鳗鲡的人工繁殖研究奠定了坚实的基础。
英文主题词Angulla marmorata; gonadotropin-releasing hormone; gonadotropins; expression of recombinant gonadotropins; artificial induction of maturation