本项目通过体细胞胚胎发生途径研究沙地云杉不同外植体、基本培养基、植物生长调节物质、吉兰糖胶以及干化处理、低温处理等对体细胞胚胎发生、增殖、分化、成熟和萌发的作用。在研究植株再生的主要调控因子的基础上,深入研究内源多胺在沙地云杉体细胞胚胎发生、成熟、萌发过程中类型、水平和比例变化及对植株再生的作用机理,研究附加多胺调节物质(MGBG、DFMA、PEG)对多胺类型、水平、比例变化的影响及其作用机理,为
本项目通过体细胞胚胎发生途径对沙地云杉植株再生调控因子及多胺的作用机理进行了研究,结果表明外植体还是成熟合子胚比较稳定;沙地云杉诱导愈伤培养基最佳组合SH+2,4-D(0.1㎎/L)+6-BA (0.1㎎/L),沙地云杉增殖愈伤培养基最佳组合SH+2,4-D(1.5㎎/L)+6-BA (0.5㎎/L)+400 mg/L谷氨酰胺。愈伤组织增长率越快,SOD酶活性越强。愈伤增长率越慢,SOD酶活性越弱;体细胞分化培养基最佳组合为LS+ABA5.0 mg/L+PEG4000 50.0 g;沙地云杉体细胞胚起源于胚性愈伤组织的单个细胞,体细胞胚的形成依次经过球形胚、心形胚及鱼雷形胚阶段,最后发育成具有子叶的成熟胚;体细胞胚分化启动时Put 含量迅速上升形成第1 个峰值, 随后有所下降。 Spd含量随着体细胞胚的成熟具有上升趋势。 Spm 含量较较低, 以致在某些发育期检测不到它们的存在。外源Put不仅可提高体细胞胚发生频率, 而且使3 种内源多胺含量均有所提高。加入多胺合成生物抑制剂对Spd和Spm有明显的抑制作用,从而促进Put的合成来达到多胺水平。