中文摘要：

申请人前期已明确血管紧张素II（AngII）参与了IgA肾病肾小球系膜细胞与肾小管上皮细胞间对话（球管对话），从而介导了肾小管上皮细胞的损伤，并且证实了过氧化物酶体增殖物受体（PPAR-γ）可在多个水平抑制AngII信号通路，在该损伤中发挥保护作用。本项目将进一步研究AngII下游因子醛固酮在该球管对话中的作用，并探讨PPAR-γ与醛固酮信号通路间相互对话的分子机制。首先，通过建立IgA肾病肾小管细胞损伤的体外模型，我们将明确醛固酮在该细胞损伤中的作用，对球管对话机制进行延伸；其次，利用荧光共振能量转移等方法从以下两方面来研究PPAR-γ与醛固酮相互对话的分子机制:1）PPAR-γ与醛固酮作用受体-盐皮质激素受体（MR）竞争性结合共激活因子，2）PPAR-γ与MR亚细胞定位；最后，联合应用PPAR-γ激动剂和醛固酮拮抗剂，观察二者在该细胞模型中协同保护作用，为IgA肾病临床治疗提供新思路。

结论摘要：

我们前期业已明确了过氧化物酶增殖物激活受体-γ (peroxisome proliferator-activated receptor-γ, PPAR-γ)和血管紧张素II在活化的肾小管上皮细胞中的对话，本课题进一步研究激活的肾小管上皮细胞中PPAR-γ与血管紧张素II下游因子醛固酮之间的交互对话。 首先，我们用不同浓度肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor, TNF）刺激近端肾小管上皮细胞系HK-2细胞，观察到HK-2可被TNF-α剂量依赖性激活，表现为炎症因子白介素6（interleukin-6, IL-6)、细胞间粘附分子（intercellular adhesion molecule-1, ICAM-1)和醛固酮受体盐皮质激素受体（mineralcorticoid receptor, MR）表达增加以及PPAR-γ表达下降；随后，我们分别使用MR 拮抗剂依普利酮和PPAR-γ激动剂匹格列酮干预TNF-α浓度梯度下激活的HK-2细胞，发现两者均能有效降低IL-6、ICAM-1和MR表达，升高PPAR-γ表达，发挥保护作用，两药合用作用更强，提示PPAR-γ与MR存在交互对话；然后，我们进一步探讨两者对话的分子机制，发现两者合用能更有效抑制核因子-κB （Nuclear Factor-Κb, NF-κB）转核； 最后，我们使用了PPAR-γ特异性拮抗剂GW9662阻断PPAR-γ的作用 ，发现匹格列酮的作用为PPAR-γ依赖。 本课题结果表明，匹格列酮通过依赖其受体PPAR-γ的方式，转录抑制MR的信号通路，其机制主要表现为抑制NF-κB 入核。依普利酮也可以升高PPAR-γ表达，提示核因子PPAR-γ和MR存在交互对话。在TNF-α活化的肾小管上皮细胞损伤中，匹格列酮和依普利酮联用较单用有着更佳的细胞保护作用，可为肾脏疾病治疗用药提供有效的选择，但其有效性尚需进一步完善动物实验及临床实验得以确定。