一氧化氮(NO)具有复杂的生物功能,目前NO与革兰氏阴性菌的耐药性有何关系仍不清楚。针对前期发现的NO消除大肠杆菌(Escherichia coli)对氨苄青霉素(ampicillin, Amp)耐药性的现象,本研究拟利用新型NO供体-β-半乳糖基化二醇二氮烯翁(β-Gal-NONOate)向细菌胞内提供不同浓度的NO,确定外源NO浓度对大肠杆菌Amp 耐药程度的影响。利用双向差异电泳技术找到NO处理前后细菌的显著差异蛋白质并给予质谱鉴定,通过全基因组表达谱芯片技术分析在基因转录水平上的差异,结合BIOLOG法碳源代谢分析及微观形态观察,综合揭示NO对Amp 耐受大肠杆菌的基因、蛋白质、代谢层面有何影响,阐明NO逆转大肠杆菌耐药性的分子机制。这不但可以弥补前人研究中由于供体带来的误差,准确体现胞内NO浓度与耐药性的关系,还有助于增加人们对NO与微生物关系的新认识及克服细菌耐药性策略的研究。
英文主题词nitric oxide;beta-Gal-NONOate;Escherichia coli;resistance;overcoming