我们通过多年在中国内蒙古呼伦贝尔盟各旗县的农村和草场对泡状肝包虫病病原多房棘球绦虫(Echinococcus multilocularis Leuckart, 1863)的野外调查研究和人工感染试验,已证明它们是一个复杂的病原群类,有四个种类在成虫结构、幼虫发育及诱导的宿主反应情况等方面均有差异。本项目拟对此四种泡状蚴的发育与遗传学进行深入的比较研究。拟用内蒙古呼伦贝尔盟的各型多房棘球绦虫虫卵分别感染实验小鼠,通过腹腔注射方法在实验室达到各病原的保种并比较观察四种病原幼虫期在鼠体内的发育情况。体外培养四种泡状蚴细胞,建立泡球蚴细胞系作为进行生物化学、分子生物学及遗传学研究的材料。从体外培养的各种病原的细胞及培养液中分离和纯化主要蛋白质,克隆并分析其基因,进行主要蛋白质的体外表达及其生物学功能观察;比较主要蛋白质及其基因在各种多房棘球蚴之间的异同,从遗传和进化角度探讨各种多房棘球蚴之间的关系
本项目是在我们承担国家自然科学基金九五重点项目"我国泡状棘球蚴(肝包虫)病原种类生态分布及流行学"优等结题后继续申请的面上课题。从2005年1月至2007年12月,我们完成了本项目预定的全部工作内容(1)从内蒙古呼伦贝尔草原野外采集回来具不同子宫形态的欧洲型的多房棘球绦虫(E. multilocularis)、美洲型的西伯利亚棘球绦虫(E.sibiricensis)和苏俄型的苏俄棘球绦虫Echinococcus russicensis)的材料;(2)通过切片染色制片和观察,证明它们子宫的不同形态是由于结构的不同不是形态变异。(3)三种泡状棘球绦虫孕节再次分别感染实验鼠,结果说明它们各自有恒定的不同的发育格式和棘球蚴结构。另一种与西伯利亚棘球绦虫稍有不同的虫体,通过证明它们虫种相同。(4)苏俄型泡状棘球绦虫幼虫期人工感染了实验羊羔,结果全部阴性。说明泡状棘球蚴,不能在牛羊食草动物体内发育。(5)对上述三种泡状棘球绦虫(肝包虫)病原进行了初步的分子遗传学、蛋白质组学探讨和鼠宿主基因及细胞的反应观察,发现它们存在差异。