采用胚胎生殖干细胞与性腺体细胞的双室和混合共培养模型研究鸡胚性腺体细胞对生殖干细胞增殖和分化的调控作用,内容包括性腺体细胞分泌的干细胞因子(SCF)和生殖干细胞上的受体(c-kit)表达的发育性变化及其与原始生殖细胞(PGC)迁移和增殖的相关性;促性腺激素借助体细胞对胚胎生殖干细胞增殖和分化的影响;性激素对体细胞和生殖干细胞的直接或间接作用,性激素受体在性腺细胞的表达与生殖干细胞发育的相关性及其
本课题以鸡生殖干细胞增殖和分化的调控为核心,研究了多种因素对鸡生殖干细胞增殖分化的影响及其机理,取得了以下结果(1)分离了鸡胚原始生殖细胞(PGC),建立并优化了PGC-体细胞体外共培养及传代模型,并通过体外培养获得了表达干细胞表面特异抗原的生殖干细胞;(2)探讨不同体细胞及多种添加物对PGC增殖的调控作用;(3)揭示了蛋白激酶A和C信号系统通路在PGC的增殖过程中的调控作用;(4)研究了植物性抗氧化活性物质大豆黄酮和槲皮素对鸡胚PGC增殖的调控作用及其机理,以及人参皂甙通过PKC/NF-κΒ途径对鸡胚PGC的增殖的信号转导机理;(5) PGC分化方面的研究表明,鸡胚生殖干细胞在体内可分化形成含有三个胚层细胞的组织瘤,体外悬浮培养条件下可以形成简单类胚体及含有三个胚层细胞的囊状类胚体,类胚体通过贴壁培养可自然分化为神经细胞、上皮细胞、肌类细胞等;(6)探讨了不同的时间及表皮生长因子和二甲基亚砜等诱导物对鸡胚生殖干细来源的类胚体分化方向的调控。(7)研究了鸡卵泡发育的激素和营养调控作用。所得结果有助于阐明家禽生殖干细胞与体细胞之间的互作机制。