本项目开展了 BLM 和大肠杆菌RecQ 解旋酶的表达、分离、纯化及鉴定,BLM 与大肠杆菌RecQ 解旋酶不同区域的功能及其相互之间的协调机理,Hg2+对BLM 解旋酶结构和功能的影响,BLM解旋酶的DNA 解链动力学机制及分子基础,RecQ 解旋酶的结构和功能的关系等研究。获得的两种高纯度的解旋酶,并具有DNA 结合活性、ATP 依赖性的DNA 解旋酶活性及DNA 依赖性的ATP 酶活性;研究了盐和PH对两种解旋酶结合到DNA上的影响;证明了Hg2+对BLM 解旋酶的酶活性具有抑制作用,对BLM 解旋酶的构象具有影响,并与解旋酶可能存在两类结合位点;BLM 解旋酶在解开双链DNA 时以单体形式存在;大肠杆菌RecQ 解旋酶在水溶液中以单体形式存在;RecQ 解旋酶有一个DNA 结合位点并具有盐依赖性。另外,建立了蛋白质结构和功能研究平台,并与中国科学院物理研究所、法国国家科学研究中心开展了合作关系。撰写论文4 篇,其中已发表1 篇,录用1 篇,有2 篇已投寄相关学报,正在审稿中。培养博士生1 名,硕士生2 名。
英文主题词Helicase; RecQ; DNA; structure-function relations