p53RFP是新近发现的受p53的转录调控的一个基因,其产物具有E3泛素连接酶活性。在本研究中,我们发现p53RFP是在低氧条件下受HIF-1α上调的一个新基因。我们对p53RFP的启动子区域进行分析,发现在p53RFP转录起始位点上游2000bp中存在三个低氧结合元件(HRE),分别为HRE1(-1317 -1314),HRE2(-1118 -1115),HRE3(-636 -633)。我们克隆了p53RFP启动子不同长度的截短片段(1780bp,1230bp,780bp),成功构建了p53RFP启动子不同长度的荧光素酶报告载体,经双荧光素酶报告系统检测发现HIF-1a显著上调启动子活性,且对启动子区域1230bp片段的活性影响最大。将1230bp 片段上的低氧结合元件(HRE)通过定点突变或截短技术发现HRE2是HIF-1α调节的核心元件。经染色质免疫共沉淀进一步验证,HIF-1α直接结合于p53RFP启动子上的HRE区域,且招募转录共刺激因子p300参与p53RFP基因的转录激活。
英文主题词p53RFP; HIF-1α;promoter; transcriptional regulation