在前期青年基金项目(30901050)资助的基础上,证明了接种根瘤菌提高苜蓿抗旱性,利用基因芯片技术,筛选出了12个与苜蓿根瘤菌共生抗旱相关高表达基因。本项目拟以紫花苜蓿和蒺藜苜蓿为材料,开展根瘤菌接种提高苜蓿抗旱性相关基因功能与调控机理研究。借助Real-Time PCR手段,在不同干旱程度、不同组织、不同品种上进行干旱候选基因表达水平差异研究,进一步筛选出3~5个目的基因。采用RACE 法得到基因全长,构建超表达载体和RNAi 载体。应用电击法将目的基因导入农杆菌GV3101中,通过叶盘法在紫花苜蓿和蒺藜苜蓿中转化,得到转基因植株。在不接种及接种根瘤菌条件下,以相对含水量(RWC)和死亡率为指标,评价其抗旱性和目的基因的效应大小。经主要抗旱生理指标测定,结合表达水平差异研究,阐明目的基因功能,揭示其抗旱机制。为苜蓿抗旱分子机理研究提供理论指导,为苜蓿抗旱分子育种提供优异基因资源。
英文主题词alfalfa;drought resistance;gene;root nodule;