中文摘要：

泌尿道感染（UTIs）易反复发作，治疗不当甚至可引发慢性感染，对UTIs发病机制的深入研究具有重要的临床指导意义。尿路致病性大肠埃希菌（UPEC）引起的UTIs约占90%，ompT是UPEC重要的毒力基因。本项目以临床分离株E44为出发菌株，用基因敲除技术构建△ompT E44。运用小鼠膀胱癌上皮细胞株MB49及人膀胱上皮细胞株5637体外细胞模型，观察ompT基因缺失对致病株粘附及侵袭能力的影响。建立C3H/HeOuJ野生型小鼠UTIs动物模型，研究ompT基因缺失对致病菌的体内存活、器官病理损伤及炎症反应影响。我们提出ompT致UTIs相关机制的假说，并通过建立细胞和动物模型，阐明ompT致病相关机制及探讨可能的机制。不仅针对UTIs，而且包括其它病原微生物感染的发病机制研究都有重要的参考意义。

结论摘要：

泌尿道感染（UTIs）易反复发作，且易转为慢性感染。临床上约90%的UTIs由尿路致病性大肠埃希菌（UPEC）引起，而ompT是UPEC重要的毒力基因。本研究以大肠埃希菌膀胱炎的临床分离株CFT073为出发菌株，用RED重组技术构建了CFT073 ompT 缺失株。在此基础上运用人膀胱癌上皮细胞株5637（ATCC HTB-9）体外模型和建立的C57/BL6小鼠UTIs体内模型，明确了野生型CFT073在粘附和侵袭尿道上皮细胞的能力明显高于ompT突变型菌株；在建立的C57/BL6小鼠UTIs模型中，还观察到野生株和回补株致膀胱及肾脏的炎症明显均较敲除株和对照严重，并且在野生株、敲除株及回补株分别感染的小鼠的血液、肾及膀胱组织检测到TNF-α、IL-6及IL-8不同程度的表达，其中野生株所致的细胞因子的表达明显高于敲除株；证实了CFT073毒力基因的表达调控与ompT相关，ompT敲除后均下调了fimH、ompA、hlyA 和cnf1的表达，且ompT与PPK1也存在着网络调控关系。本研究验证了我们提出的ompT致UTIs相关机制假说，阐明了ompT致病相关机制，为防治UTI提供理论和应用的依据。不仅针对UTIs，而且对其它病原微生物感染的发病机制研究都有重要的参考意义。