小麦白粉病(Blumeria graminis f. sp. tritici)目前在我国已成为小麦的主要病害。在对其越夏菌源和秋苗菌源调查时,由于受不利气候条件的影响,此时病菌侵染后多数往往处于潜伏状态而不表现症状,从而使我们对病害菌源量的调查和估计不准确,进而影响对病害的准确预测。近年来现代分子生物学的快速发展,为此领域的研究提供了强有力的方法和工具。本研究根据小麦白粉菌和小麦的rDNA间隔区(ITS)序列,设计和合成PCR引物,扩增筛选出了对小麦白粉病菌和寄主小麦有特异性条带的引物,在此基础上设计和合成Nested PCR的内外引物和实时定量PCR的引物和探针,对其敏感性测定的结果表明,Nested PCR和实时定量PCR的检测灵敏度明显高于常规的PCR,通过对室内和田间潜伏侵染叶片病菌的DNA检测和验证,开发出了特异性强、灵敏性高、准确性好的用于越夏菌源和秋苗菌源调查的Nested-PCR和实时定量PCR分子检测技术,为此病害的监测和预测提供了新的工具。
英文主题词Blumeria graminis f. sp. tritici, Nested PCR, Real-time PCR, detectiton technique, disease monitor