微生物在城市生活垃圾堆肥过程中起关键作用,微生物学群落组成的深入研究对于深刻理解堆肥处理过程的本质、提高处理系统的性能以及进行工艺革新等具有重要的意义。然而,人们对堆肥处理过程的微生物学,认识还很肤浅,这在很大程度上是由于受到传统分析手段的限制。随着人们对微生物的原位生存状态研究,越来越发现常规的分离培养方法很难全面地估价自然环境中微生物群落多样性。本项目拟采用16SrRNA/rDNA核酸序列测定、荧光原位杂交和变性梯度凝胶电泳并结合传统菌种分离鉴定方法对城市生活垃圾堆肥化处理过程中的微生物群落进行结构、功能以及微生物种群动态变化规律等方面的研究,从本质上解答城市生活垃圾堆肥化处理的微生物学原理问题,为堆肥工艺的优化提供指导,并确定堆肥腐熟度的分子生物学监测指标。同时,建立起一套以16SrRNA/rDNA序列分析技术为基础的环境微生物群落分子生态学研究体系。
本项目拟采用16SrRNA/rDNA核酸序列测定、荧光原位杂交和变性梯度凝胶电泳并结合传统菌种分离鉴定方法对城市生活垃圾堆肥化处理过程中的微生物群落进行结构、功能以及微生物种群动态变化规律等方面的研究,提出和改进了溶菌酶法、超声波破碎法和蛋白酶K-CTAB法等3种方法从环境样品直接提取微生物DNA。为了初步了解堆肥中的细菌群落及其动态变化情况,使用餐厨垃圾进行为期18天的小规模堆肥,结合统计分析、条带测序和系统发育分析对餐厨垃圾堆肥过程的细菌进行了分子生态学研究。结果表明随温度升高,堆肥中细菌多样性下降,不同时期的优势菌群不同,高温阶段细菌种群以嗜热的芽孢杆菌属细菌为主。