中文摘要：

内质网应激诱发的未折叠蛋白反应与肝癌发生、发展密切相关，肝癌细胞耐受内质网应激诱导的凋亡是未折叠蛋白反应发挥促肝癌作用的必要条件，认识肝癌细胞抵抗内质网应激诱导凋亡的分子机制是亟需解决的科学问题。膜联蛋白A1/A2的异常高表达在肝癌发生中的作用机制也是尚未解决的科学问题。该项目拟采用RT-PCR、siRNA、Western blot、流式细胞和小鼠肝癌模型等实验技术首先明确未折叠蛋白反应对膜联蛋白A1/A2的调控作用，进而探讨膜联蛋白A1/A2在肝癌细胞抵抗内质网应激诱导凋亡中的作用及其分子机制，并通过小鼠体内实验深化对膜联蛋白A1/A2和未折叠蛋白反应在肝癌发生中的生物学功能认识，从而为肝癌治疗提供新的理论基础。因此，本项目对研究肝癌的发生和治疗具有重要意义。

结论摘要：

本研究项目的结果包括五方面内容(1)膜联蛋白ANXA1在肝癌细胞抵抗内质网应激诱导凋亡中的作用；(2)内质网应激对酪氨酸蛋白激酶受体c-Met信号转导的调控及其分子机制；(3)应激通路p38 MAPK对酪氨酸蛋白激酶受体c-Met信号的调控及其分子机制；(4)内质网应激对肝癌细胞耐药的影响及其分子机制；(5) AMPK小分子抑制剂Compound C对肝癌等肿瘤细胞凋亡的诱导作用及其分子机制。 第一方面的研究发现肝癌细胞中ANXA1呈高表达状态，干扰ANXA1表达后，肝癌细胞对内质网应激诱导凋亡的敏感性显著增加。这表明ANXA1是肝癌细胞适应内质网应激的重要机制之一，但ANXA1参与该调控的机制尚不明确。 第二方面研究了内质网Ca2+紊乱和糖基化障碍对酪氨酸蛋白激酶受体c-Met的调控及其分子机制。结果发现内质网Ca2+紊乱诱导了c-Met新型分子 (p190MetNC) 的生成，p190MetNC为比正常条件下的c-Met (p190Metαβ) 更为稳定的单链分子。p190MetNC的生成代偿了内质网应激介导的p190Metαβ的降解，进而对肝癌细胞适应内质网应激起重要作用。此外，该部份结果也发现内质网糖基化障碍阻碍了c-Met的糖基化加工修饰，未发生糖基化加工修饰的c-Met虽然也能够实现活化位点的磷酸化修饰，但是其不能实现细胞膜定位，因而未发生糖基化加工修饰的c-Met只能在有限的程度上代偿正常c-Met的功能。 第三方面研究了p38 MAPK对酪氨酸蛋白激酶受体c-Met的调控及其分子机制。结果发现胆管癌细胞中p38 MAPK和c-Met均呈高度磷酸化状态。p38 MAPK通过抑制去磷酸化而维持了c-Met的高水平磷酸化，进而发挥了自身在胆管癌中的促癌效应。 第四方面研究了内质网应激对肝癌细胞耐药的影响及其分子机制。结果发现适度的内质网应激抑制顺铂介导的肝癌细胞凋亡。内质网应激对自噬和Hsp27的调控参与了其在肝癌细胞抗化疗药物中的作用。 第五方面研究了AMPK小分子抑制剂Compound C对肝癌等肿瘤细胞凋亡的诱导作用及其分子机制。结果发现转录抑制在Compound C诱导的肿瘤细胞凋亡中起重要作用。Compound C对肿瘤的生长抑制作用表明其作为抗肿瘤药物的潜质。