中文摘要：

胰腺癌预后极差，手术切除率低，故化疗成为胰腺癌治疗的重要手段之一。但由于化疗耐药的发生，使得一线化疗药物- - 吉西他滨对胰腺癌的有效率仅为10%左右，因此迫切需要寻找逆转吉西他滨耐药的有效治疗策略。Siah具有泛素连接酶E3活性，近来已成为新颖的肿瘤治疗靶点。经查阅文献，我们推测胰腺癌细胞发生吉西他滨获得性耐药的可能机制为吉西他滨引起的DNA损伤通过激活ATM/ATR激酶系统抑制HIPK2降解，进而磷酸化激活P53，上调Siah-1表达，通过泛素- - 蛋白酶体系统反馈作用于HIPK2，并促使其降解，最终抑制P53磷酸化激活，使胰腺癌细胞发生凋亡抑制，导致吉西他滨耐药发生，对该机制在肿瘤化疗耐药形成中的作用尚未见报道。我们期望通过本课题的研究，探究在胰腺癌治疗中，Siah-1与HIPK2对吉西他滨耐药发生的作用机制，并寻找逆转耐药的最佳作用靶点及化疗剂量，从而增加吉西他滨治疗胰腺癌的有效性。

结论摘要：

胰腺癌预后极差，手术切除率低，化疗仍是胰腺癌重要的治疗手段之一，但即使目前临床胰腺癌一线化疗用药——吉西他滨，其总体有效率仅为10%左右，因此迫切需要寻找逆转吉西他滨耐药的有效治疗策略。在本课题经费的资助下，依据项目计划书的内容，我们重点探讨了失神七同系物-1 (Siah-1)在胰腺癌吉西他滨耐药中的作用，证实P53磷酸化依赖的Siah-1高表达与胰腺癌吉西他滨耐药相关，通过沉默Siah-1可以在一定程度上增强吉西他滨的促凋亡作用。此外，还进一步证实，胰腺癌耐药细胞株中有自噬激活现象。在完成以上研究的基础上又对以下三方面的研究进行了部分资助①证实二氢青蒿素（DHA）能够通过诱导氧化应激上调DR-5的表达，增加Apo2L/TRAIL敏感性，促进胰腺癌细胞发生凋亡。②证实缺氧可能通过上调胰腺癌细胞NF-κB P65活性，调控上皮-间质转化（EMT）相关蛋白表达，增强其迁移侵袭能力，降低对吉西他滨的药物敏感性。③证实扁蒴藤素能够以浓度依赖性和时间依赖性的方式降低胰腺癌细胞的增殖能力。扁蒴藤素可以导致细胞G1期阻滞，这可能与下调cyclins (D1，E) 和细胞周期蛋白依赖激酶(cdk2，cdk4，cdk6 )有关，同时还与诱导WAF1/p21 和 KIP1/p27表达相关。扁蒴藤素还能够引起细胞凋亡，劈裂激活caspase-3，调控Bcl-2家族蛋白表达，抑制NF-κB的DNA结合能力。