中文摘要：

雷公藤甲素(TL)具有良好的应用与开发前景，但其毒性限制了它在临床上的进一步应用，而其毒性机制并没有得到充分的研究。药物转运体在肿瘤细胞耐药与药物细胞选择性毒性中起着很重要的作用。前期工作发现，睾丸对TL的毒性非常敏感，且具有明显的细胞选择性。进一步的体外研究发现TL是人源药物转运体BCRP的底物。本研究在前期工作的基础上拟采用Bcrp基因敲除小鼠考察Bcrp基因敲除对TL睾丸损伤，TL睾丸分布以及其它药代动力学参数的影响。采用稳定表达Bcrp的细胞系考察Bcrp转运TL的动力学机制以及Bcrp高表达对TL细胞毒性的影响。本研究有助于深入阐释雷公藤甲素毒性机制，为临床用药提供依据，有助于临床用药时避免可能的药药相互作用，更可以为雷公藤甲素的减毒增效开发提供新的筛选靶点。

结论摘要：

雷公藤甲素及其衍生物在临床前和临床试验中展现出良好的抗肿瘤，抗炎和抗风湿的药效学作用，但雷公藤甲素及其衍生物所致的睾丸损伤严重限制了这一类药物在临床上的进一步研发和应用，而其睾丸损伤的机制并不清楚。 针对这一问题，本课题首先深入研究了外排性药物转运体BCRP在雷公藤甲素（Triptolide，TL）所致睾丸损伤中的作用。研究发现作为BCRP的底物，TL通过下调RNA聚合酶II降低Bcrp的表达水平，进一步增加其在睾丸中的含量，加重其睾丸损伤作用。这一部分研究提示了TL与其它药物（BCRP抑制剂）联用时，可能存在的药药相互作用；而在BCRP低表达人群中使用TL时，需要更加密切的关注其暴露量，同时也为雷公藤甲素及其衍生物的开发和临床应用提供了新的数据支持。 在上述研究的基础上，本课题进一步探讨了TL最重要的衍生物LLDT-8（(5R)-5-hydroxytriptolide, LLDT-8）的睾丸敏感性机制，发现LLDT-8通过抑制TAK1信号通路诱导精母细胞凋亡。此部分研究首次发现了TAK1的第412位丝氨酸的磷酸化（TAK1-Ser412）在精母细胞存活和增殖中的重要作用。LLDT-8在精母细胞中通过抑制TAK1此位点的磷酸化，同时下调RNA聚合酶II的表达，促进了精母细胞的凋亡。而在睾丸支持细胞中，则没有上述作用。本研究揭示了睾丸对LLDT-8更为敏感的可能的分子作用机制，为雷公藤甲素及其衍生物的研发，降低睾丸损伤作用，提供了TAK1这一新的筛选靶点。 在圆满完成申请书中原有工作计划的基础上，本课题进一步揭示了TL最重要的衍生物LLDT-8的睾丸敏感性机制。本课题发现了药物转运体BCRP和TAK1在雷公藤甲素及其衍生物所致睾丸损伤中的重要作用。睾丸损伤是影响雷公藤甲素这一类药物研发和临床应用的重要因素，本课题的新发现为这一类药物的研发提供了新的筛选靶点，将有助于雷公藤甲素这一类药物的临床应用。