中文摘要：

蜜蜂是人类食物链上最重要的一环。人类赖以生存的经济作物约80%需要蜜蜂授粉。同时，蜂产品自古以来是人类公认的健康食品。我国是世界最大的蜂产品生产国和出口国。蜜蜂螨害是世界养蜂业最大的威胁。养蜂业严重依赖化学药剂治理蜜蜂害螨。但是，抗性和污染问题困扰养蜂这一 "甜蜜的事业"。因此，养蜂行业呼唤环境友好型治理蜂螨的技术，特别是抗螨蜜蜂的培育。本项目旨在于利用从中华蜜蜂肠道中分离的、可致死狄斯瓦螨的菌株、分离和纯化抗狄斯瓦螨蛋白，克隆相关基因和原核表达杀螨蛋白，构建抗狄斯瓦螨转基因蜜蜂，为研制抗螨生物制剂和利用转基因技术培育抗螨蜜蜂提供技术支撑。

结论摘要：

蜜蜂是人类食物链上最重要的一环。人类赖以生存的经济作物约80%需要蜜蜂授粉。蜜蜂螨害是世界养蜂业最大的威胁。养蜂业严重依赖化学药剂治理蜜蜂害螨。但是，抗性和污染问题困扰养蜂业。因此，养蜂行业呼唤环境友好型治理蜂螨的技术，特别是抗螨蜜蜂的培育。本项目利用从中华蜜蜂肠道中分离的、可致死狄斯瓦螨的粘质沙雷氏菌GEI菌株、分离和纯化抗狄斯瓦螨蛋白，克隆其编码基因chiA,chiB,chiC1并原核表达获得有效杀螨蛋白；通过分离并培养中蜂中肠细胞，建立细胞系，可连续培养20周；调查国内中、意蜂病毒的分布情况；获得狄斯瓦螨诱导中、意蜂差异表达基因83个及中、意蜂营养杂交的差异蛋白质点129个并分别进行生物信息学分析；分析中蜂幼虫受CSBV侵染后免疫基因的表达变化，推测RNAi通路可能参与蜜蜂病毒防御；筛选CSBV的RNAi靶序列，研究其dsRNA 在中蜂活体内对病毒的抑制效果，获得有效片段dsSbv1 和 dsVp1；构建转基因转座质粒，尝试不同转染方式的转染效率构建抗狄斯瓦螨转基因蜜蜂，为研制抗螨生物制剂和利用转基因技术培育抗螨蜜蜂提供技术支撑。本项目达到了预期目标，完成了合同规定指标，获得抗螨基因，构建转基因载体，申请专利并获得授权 4 项，发表SCI论文 4 篇，培养博士2名，硕士 3 名。