中文摘要：

在众多的基因诊断技术中，荧光偏振基因探针因其具有的独特优势近年来受到了人们的普遍关注。本项目将在对现有方法进行比较研究的基础上，结合临床应用的考虑，开发一系列新型的荧光偏振基因探针。并从癌基因、抑癌基因的突变检测及端粒酶活性分析两方面入手，对荧光偏振基因探针在肿瘤基因诊断中的应用研究进行探索，从而为发展我国的基因诊断事业作出贡献。

结论摘要：

围绕端粒酶活性的特异性定量检测及单碱基基因突变的高度特异性识别，开展了相应的荧光基因探针及荧光偏振基因探针的研究工作。在荧光偏振基因探针方面，开发了一种适用于单碱基基因突变检测的发夹型单标记荧光偏振基因探针，与线型探针相比，其识别单碱基错配的能力大大提高。在此探针的3′-端引入一段与靶基因无关的碱基序列可使反应前后的信号差别进一步增强；另外，开发了一种用于端粒酶活性检测的荧光偏振基因探针，利用该探针，可使有无端粒酶活性的检测体系的荧光偏振信号呈现出两种相反的变化趋势，该探针可用于抗癌药物对端粒酶活性的抑制作用研究，进而可进行抗癌药物的筛选。在荧光基因探针方面，通过采取一种特殊的PCR扩增策略，成功地将端粒序列特异性分子信标探针引入到了端粒酶的活性检测当中，分子信标探针的引入极大地增强了端粒酶活性检测的特异性，在此基础上，内标探针的使用则消除了组织或细胞提取液中酶抑制剂的存在对检测所带来的影响。将该法应用于金属配合物类抗癌药物的筛选，发现了一种对端粒酶活性具有抑制作用的大环镍配合物及一种对端粒酶活性具有激活作用的联吡啶锰配合物，并对它们非特异性切割DNA的能力进行了研究。