本研究利用反义寡核苷酸多位点封闭HBx基因、探讨其对内源性表达HBx蛋白的人类肝癌细胞系Hep 3B在活体裸小鼠内的生长抑制作用。该研究通过以包含HBx基因起始密码子的序列和编码HBx蛋白中具有反式激活功能的三个关键区域(第46~52位、61~69位、132~139位氨基酸)对应的三段基因序列为靶目标,合成4段反义寡核苷酸,特异性封闭靶基因,结果显示HBx反义片段AS1和AS4有效地封闭了HBx基因,在分子水平上导致HBx、突变型P53蛋白水平的下调、端粒酶活性下降以及肿瘤细胞凋亡指数增加,从而有效延长人类肝癌组织在裸小鼠移植瘤形成的潜伏期,并有效抑制肝癌生长,提高小鼠患癌后的生存时间,具有潜在的临床应用价值,同时腹膜腔注射是反义寡核苷酸进入活体裸小鼠并发挥干扰作用的一条有效途径。本研究采用反义技术在转录及翻译水平特异性阻断HBx基因、抑制HBx蛋白表达从而抑制活体内肝癌的生长,此项技术可望为肝癌新的治疗方法的应用提供试验依据和可能。
英文主题词nude mice;hepatocellular carcinoma; antisense oligonucleotides;HBV;HBx