本研究在建立RAPD优化体系的基础上,利用随机引物对毛壳菌属14个菌株和6个土传植物病原菌株进行分析,筛选到球毛壳ND35特异性RAPD条带,并根据测序结果设计特异PCR引物,得到引物对Cg ND35-F/Cg ND35-R,获得了有实用价值的特异SCAR检测标记并对杨树、小麦和生姜等大田作物中接种定殖的球毛壳ND35菌株进行了分子检测。又根据SCAR标记获得的球毛壳ND35菌株特异片段设计了另一对用于实时荧光定量PCR检测的引物ND35-1/ND35-2,以球毛壳ND35菌株基因组DNA为模板,利用此引物建立并优化了SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR反应的最佳体系,并据此对杨树和黄瓜两种植物中ND35菌株的定殖情况进行了检测。结果表明该引物对可以用于实时荧光定量PCR检测球毛壳ND35种群数量动态变化。另外,还进行了球毛壳ND35侵染定殖后对植物生长的影响和生防机理研究。这为深入了解内生菌的生防机制,制定更切实际的防治策略,提高内生菌毛壳的生防效率奠定了基础。
英文主题词Chaetomium globosum strain ND35; molecular detection; real-time PCR; SCAR marker