中文摘要：

L-半胱氨酸广泛应用于医药、食品卫生等行业，传统的制取方法是将毛发酸水解，但收率低、环境污染严重。目前用微生物酶法转化可制备L-半胱氨酸。2002年Shiba最新报道了以DL-2-氨基-?2噻唑啉-4羧酸（ATC）为底物，N-氨甲酰-L-半胱氨酸为中间产物合成L-半胱氨酸的代谢途径（N-代途径），有别于上述报道，本研究室自行分离获得一株假单胞菌TS-1138菌株，初步研究表明该菌株以S-氨甲酰-L

结论摘要：

L-半胱氨酸广泛应用于医药、食品、化妆品等行业，传统的制取方法是将毛发酸水解，但耗能高、收率低且环境污染严重。本研究采用自行分离的假单胞菌TS-1138菌株，以化学合成的DL-2-氨基-?2-噻唑啉-4羧酸（DL-ATC）为底物，经微生物酶法转化合成L-半胱氨酸。本研究对该转化过程所涉及的关键酶（L-ATC水解酶、S-氨甲酰-L-半胱氨酸氨甲酰水解酶和L-半胱氨酸脱巯基酶）的基因进行克隆和鉴定，阐明了假单胞菌TS-1138菌是经由S-代途径转化DL-ATC合成L-半胱氨酸；建立了一种从蛋白水平一步去除L-半胱氨酸脱巯基酶，提高L-半胱氨酸转化率的技术；通过遗传诱变的方法，筛选获得低脱巯基酶活性的高转化率突变菌株；利用蛋白质组学和实时荧光定量PCR技术研究了底物DL-ATC对相关基因表达的影响，并构建了Mu转座随机突变文库，筛选获得合成L-半胱氨酸能力发生变化的菌株，以期对假单胞菌TS-1138合成L-半胱氨酸的代谢途径进行更为深入的研究；此外，本研究还探讨了最佳转化和分离提取工艺，在10L发酵罐水平上建立了一套从发酵到纯化获得终终产物L-胱氨酸的完整工艺。