中文摘要：

我国向欧盟、日本等出口肉鸡屡屡受阻的两大原因一是新城疫流行严重，二是抗球虫药物残留量较高。本项目旨在以绿色荧光蛋白基因为报告基因、以新城疫病毒F蛋白基因为导入基因构建能稳定表达新城疫病毒F蛋白的转基因柔嫩艾美耳球虫北京早熟株(BJS07-Pre123)，探索这种遗传修饰球虫接种鸡群后，能否同时激发鸡群抗球虫和抗新城疫的双重免疫应答。该系统的建立可能预示着一种新型疫苗生产体系的问世，即用活疫苗（活球

结论摘要：

新城疫和高致病性禽流感的持续发生给我国的规模化养禽业造成了巨大损失，而现在H5N1禽流感对人类健康的威胁更是受到学术界和公众的极大关注。本研究项目旨在开发一个可以表达外源的新城疫F抗原蛋白的转基因球虫，并进一步延伸，使这个转基因体系可以表达其它重大禽病病原的抗原基因，从而实现用转基因球虫作为活疫苗预防鸡球虫病和新城疫或其它疫病的双重目的。我们在项目实施过程中，完成了含有黄色荧光蛋白报告基因，以及F基因或禽流感抗原基因的转染载体的构建。我们通过限制性内切酶介导的转染，将球虫的转染效率从10-6提高到10-3，进一步地实现了球虫的体内转染实验，最终实现了稳定转染。到目前，我们已获得表达黄色荧光蛋白和禽流感NP抗原表位的两个转基因球虫系。这表明我们初步实现了构建转基因球虫体系的工作。在此基础上，F基因的球虫转基因还有待于我们进一步的优化研究。