中文摘要：

采用荧光素酶重组与互补策略，构建带萤火虫荧光素酶（firefly luciferase, Fluc）报告基因的载体ANluc（△NS5A/B）BCluc，将Fluc分成NFluc和CFluc，使其处于低活性状态。NFLuc和CFLuc分别与两个可紧密结合的小分子多肽A肽和B肽相连，形成ANFLuc和BCFLuc，中间由NS3/4A的切割位点NS5A/B相连形成ANluc（△NS5A/B）BCluc。当其与NS3/4A共表达时，在NS5A/B位点发生蛋白水解作用，使ANFLuc 和BCFLuc分离，通过A肽和B肽的紧密结合作用使NFluc和CFluc重新组合形成完整的Fluc，恢复其荧光素酶活性。在细胞水平将ANluc（△NS5A/B）BCluc与NS3/4A共表达或通过水动力转染法将ANluc（△NS5A/B）BCluc与NS3/4A表达载体共转染到小鼠体内，NS3/4A对载体ANluc（△NS5A/B）BCluc发生切割，使荧光素酶活性上调，荧光素酶活性与NS3/4A的表达量成正比。此监测体系可用来进行HCV NS3/4A丝氨酸蛋白酶抑制剂的作用效果评价。