脊髓损伤是世界性难题,其中,急性脊髓损伤(ASCI)是广泛研究的焦点,而临床上更为常见的慢性脊髓损伤(CSCI)却较少受到关注。相对于ASCI,CSCI的修复更为困难。损伤区顽固胶质瘢痕形成和极其不利的微环境是CSCI修复治疗的主要屏障。如果能有效消除胶质瘢痕和明显改善损伤区周围微环境,则有可能获得突破。硫酸软骨素酶ABC(ChABC)和神经营养因子(NFs)是可能攻克CSCI的治疗策略,但目前的治疗效果却不尽如人意。我们认为,药物的低利用率和机体对药物缺乏反应性是主要问题所在。针对上述问题,本课题拟采用胶原靶向技术,高效结合和利用硫酸软骨素酶ChABC来消除胶质瘢痕,并拟联合siRNA技术和基因转染技术有效调动内、外源性神经营养因子以期改善损伤区周围微环境,达到有效促进轴突再生和功能恢复的预期目标,为CSCI修复的治疗提供依据。
spinal cord injury;neurotrophic factors;Chondroitinase ABC;Neurotrophins;gene silence
本课题利用分子克隆技术,以腺相关病毒为载体,将BDNF 转染至HUMSCs,成功构建了BDNF-HUMSCs增强BDNF表达,并从大鼠肌腱中提取I 型胶原,然后利用分子生物学克隆技术,将ChABC 的基因编码序列插入CBD,成功构建CBD-ChABC来消除脊髓损伤后的胶质瘢痕,正在完成siRNA构建的相关工作,并在体外进行功能学检测。完成了动物模型的建立,并在体内进行了初步检测工作。BDNF转染HUMSCs,CBD-ChABC为国内外首次构建,之前未见报道。该课题成果为脊髓损伤的治疗开辟了新的治疗思路。本课题共形成SCI论文1 篇;课题负责人参加国内学术会议1 次;培养毕业硕士研究生1 人。