本课题开展了不同方法构建ihpRNA表达载体的研究,证明GatewayTM技术是获得IR载体的有效方法;研究了反向重复序列长度和不同内含子对编码ihpRNA沉默效果的影响,证明861bp片段构建的IR载体比215bp构建的IR载体沉默效果好;构建了防卫反应信号相关基因RAR1、SGT1的表达载体,并对编码区进行分析,将上述基因转化拟南芥,分别获得pBI121+RAR1、pBI121+RAR1-GUS、pBI121+SGT1、pBI121+SGT1-GUS阳性植株2,12,18和1株,抗病性分析表明,超表达RAR1的拟南芥与野生型相比,其对核盘菌的抗性有明显提高,延迟发病;开展了PDS, RAR1、SGT1基因的TRV载体的构建及表达试验,证明TRV不是番木瓜理想的基因沉默表达载体;进行了番木瓜WRKY 和C2H2 锌指转录因子家族序列的信息学分析,用实时定量PCR调查了上述转录因子的协迫反应,并克隆了突出的上调表达基因;研究了在非生物协迫下,C2H2 锌指转录因子的上调和下调反应规律并进行了亚细胞定位。
英文主题词hairpin RNA(hpRNA);virus-induced gene silencing(VIGS);defense signaling;papaya ringspot virus(PRSV);transcription factor