中文摘要：

由于微生物对抗生素的耐药性问题日益严重，急需发现和筛选具有新的作用机理的抗菌药物。几乎存在于所有生物的抗菌肽是非常有前途的候选物。而丰富的海洋生物是抗菌肽筛选的巨大的基因库。本项目拟建立一种全新的抗菌肽基因克隆技术平台-抗菌肽高通量筛选克隆技术, 通过该技术平台筛测来自多种海洋生物的基因库,克隆得到具有杀菌抑菌作用的新型抗菌肽，并进行重组表达研究，同时研究抗菌肽的表达模式。该项研究在理论上可以为阐

结论摘要：

抗菌肽具有广谱抗菌活性和特殊的抗菌机理。由于微生物对抗生素的耐药性问题日益严重，需要发现和筛选具有新的作用机理的抗菌药物。海洋生物是抗菌肽筛选的巨大的基因库。本项目利用建立的抗菌肽基因分离技术平台，筛测来自海洋生物(主要以对虾和扇贝为材料)的基因库, 克隆得到具有杀菌抑菌作用的、具有自主知识产权的新型抗菌肽，并进行重组表达、抗菌谱和毒理等方面的研究。同时研究抗菌肽在体内的表达模式。该项研究在理论上可以为阐明动物的先天免疫的机制提供资料，在实践上有望用于新一代高效抗感染剂的开发。通过本项目的实施，我们分别建立了细菌和病毒刺激的中国明对虾肝胰腺的cDNA文库及血细胞噬菌体展示文库。筛选并克隆得到对虾素-5、C-型凝集素、含单一乳清酸性蛋白结构域的抗菌肽、甲壳肽I、II和III、溶菌酶、抗脂多糖因子、乙酰辅酶A结合蛋白等抗菌肽基因和其他可能与免疫相关的基因，如组织蛋白酶L、组织蛋白酶C、O-甲基转移酶基因和核苷二磷酸激酶等。对这些基因进行了表达调控、重组表达、纯化和性质研究。其中对虾素-5、C-型凝集素和含单一乳清酸性蛋白结构域的抗菌肽表现出广谱抗菌活性，有进一步开发的潜力。