中文摘要：

HIF-1是参与缺氧基因表达调控的重要转录因子，在对抗缺氧细胞损伤中起重要作用。IPAS是缺氧诱导肺组织表达的HIF-3α的可变剪接异构体，能特异抑制HIF-1的转录激活功能。我们推测IPAS可能通过抑制HIF-1功能在急性缺氧肺损伤中发挥作用。为了验证这一设想，我们前期实验发现，模拟海拔8000m处理6h后，小鼠肺组织含水量显著增加，IPAS以及调控基因可变剪接的剪接因子Tra2β的mRNA水平显著增加。在此基础上，本项目围绕缺氧－Tra2β－IPAS－HIF-1－急性缺氧肺损伤的整体思路，从整体动物和离体细胞水平，研究IPAS在急性缺氧肺损伤中的作用，阐明剪接因子Tra2β对IPAS表达的调控作用，并从内皮细胞通透性变化角度阐明Tra2β－IPAS－HIF-1途径参与急性缺氧肺损伤的分子机制。该研究将为深入认识急性缺氧肺损伤的发生机制提供新线索。

结论摘要：

本项目通过采用RT-PCR、Western blot、流式细胞检测技术、荧光探针检测、放射免疫法等检测方法，检测了离体以及在体中IPAS的表达及其与急性缺氧肺损伤、肺血管内皮细胞分泌功能紊乱中的作用。我们的研究显示，①缺氧诱导整体动物肺组织以及培养内皮细胞中IPAS的表达，增加肺组织中含水量、肺干/湿比值。②缺氧导致内皮细胞中NO、ET-1分泌失衡，而用丁酸钠干预抑制HIF-1α的表达，这种失衡可以得到一定程度的逆转，提示HIF-1α的表达失调可能是缺氧导致NO、ET-1分泌失衡的原因。③构建了IPAS表达载体，但由于它是一种可变间接异构体，并不能正常转染后表达和发挥功能，所以调整为使用丁酸钠抑制HIF-1α，发现对内皮细胞的功能有改善作用，间接提示IPAS这种HIF-1的特异抑制分子，可能对缺氧导致的肺损伤有一定的抑制作用。目前需要明确IPAS与HIF-1α结合位点，构建剂量依赖的HIF-1抑制载体，深入探明通过IPAS干预HIF-1α对内皮细胞功能的影响。