我们利用较高的静水压力处理水稻种子,发现高压可以对处理当代的生长发育特性产生明显的影响,同时可以诱导水稻产生变异,并且已经筛选到了一系列的稳定突变株,本研究拟同时利用高压处理当代和从高压处理的后代中筛选到的突变体为材料,利用mRNA差异显示和分子标记技术等研究高压对水稻基因表达和诱变的影响,初步揭示高压影响水稻生长发育和诱变的分子机理,为高等植物高压生物学研究积累数据和为高压诱变育种提供理论依据。
本研究以高压处理当代和后代中筛选到的突变体为材料,对高压的某些生物学效应进行了研究,发现 1、高压处理能显著降低种子的发芽率和成苗率;经高压处理后幼苗前期生长明显受抑制,不同类型的水稻品种耐压性不同。高压能影响种子萌发过程中同工酶的表达、细胞膜透性、淀粉酶活性,破坏细胞和叶绿体的结构,这可能是种子发芽率和成苗率降低,以及幼苗前期生长受抑制的主要原因。 2、经高静水压处理的当代或后代群体中出现了熟期、株高等多种类型的突变体。部分性状属于质量性状突变;部分性状属于数量性状突变。 3、通过采用SSH结合MOS技术构建了高压处理后种子萌发过程中诱导或抑制表达的差减cDNA文库,经筛选获得了1160个重组克隆。测序结果表明,大量基因表达受到了影响,受影响的基因主要涉及到代谢、胁迫响应、转录调节、转运调控及信号传导等方面。RAPD和ISSR分析的结果表明,突变株系与原种DNA之间存在6.5%~30.3%的多态性差异。单细胞凝胶电泳的结果表明,高压可导致DNA断裂,并且这种断裂是可以修复的,但高压处理后与DNA修复有关的酶基因表达模式发生了改变。这一结果从DNA分子水平上初步揭示了高压的诱变机理。