建立了多种新型多孔性有机-无机先进性功能材料制备方法,得到表面具有不同形貌特征及选择性的材料。以合成的大孔壳聚糖-硅胶有机-无机复合材料为基质,共价偶联三嗪染料,实现了形貌良好、配基密度适当的染料亲和色谱固定相材料的制备。以天然过氧化物酶为核苷酸识别蛋白质,研究了过氧化物酶的变性方法,深入考察了添加小分子物质对过氧化物酶复性效率的影响并筛选出染料亲和色谱复性的最佳洗脱剂。研究了变性过氧化物酶与天然过氧化物酶亲和色谱过程的差异,考察了变性过氧化物酶初始浓度对其折叠复性过程的影响及复性过程动力学特性,建立了染料亲和色谱对变性过氧化物酶的高效、快速复性新方法。与常规稀释复性相比,在相同复性效率下,所建立的新方法可使初始蛋白质浓度提高20倍。同时,开展了染料亲和色谱复性过氧化物酶的放大实验,证实了本项目发展的价格低廉、性能良好的染料亲和吸附剂可用于较大量过氧化物酶复性。基于项目建立的有机-无机功能性复合材料制备方法,开展了生物传感的研究,构建了多种仿生界面,并成功应用于生物识别电化学传感研究。
英文主题词Dye affinity Chromatography;Refolding;Protein;Organic-inorganic