中文摘要：

血管内皮细胞是血管壁组织和血液之间的第一道屏障，其结构和功能的损伤可导致内膜通透性增加是动脉粥样硬化(AS)发生、发展过程中重要的一环。动脉内膜通透性与内皮细胞收缩、细胞间连接蛋白的结构、功能是否正常密切相关。我们先前的研究表明实验性AS兔动脉内膜的通透性明显增加，且动脉壁MLCK表达逐渐增强、活性升高，提示在实验性AS形成过程中，MLCK表达和活性的增加与动脉内膜通透性加大密切相关。MLCK是否引起动脉内皮细胞的连接发生变化而导致内膜通透性变化？如何调控？尚不清楚。本项目将复制实验性兔AS模型，通过MLCK抑制剂的干预，建立高胆固醇血症细胞模型，通过MCLK、MEK抑制剂等干预和MLCK RNA干扰实验，分析实验性AS兔动脉壁MLCK的表达及其活性是否参与调控实验性AS兔动脉内皮细胞连接蛋白的表达、分布而影响内膜通透性，为进一步研究打下基础。

结论摘要：

本研究复制了实验性兔AS模型，用MLCK抑制剂ML-7进行干预研究。结果表明随着实验性AS兔动脉壁MLCK 表达的逐渐增强、活性逐渐升高，动脉内膜的通透性也逐渐增加，MLCK表达和活性的变化与动脉内膜通透性呈明显正相关；ML-7明显降低高胆固醇血症引起升高的动脉内膜通透性、减少动脉粥样硬化斑块、增加动脉壁细胞膜上的occludin含量、促进内皮细胞紧密连接蛋白发生重排而恢复正常结构。培养HUVEC培养液中加入的oxLDL可促进MLCK的表达，浓度越高促进效果越明显。Ml-7明显降低oxLDL引起的HUVEC通透性升高、明显降低ox-LDL引起的血管内皮细胞MLCK的表达和MLC磷酸化的增加、降低HUVEC的occludin表达，但增加细胞膜occludin的含量。提示高胆固醇血症增加兔动脉内皮细胞MLCK表达和活性而促进MLC的磷酸化，引起血管内皮细胞紧密连接蛋白出现明显再分布，失去正常细胞紧密连接的结构。内皮细胞向心性收缩，细胞紧密结构和功能丧失，引起内皮细胞间隙增大，导致内膜通透性增加，血液中oxLDL等通过增大的内皮细胞间隙进入动脉壁，促进AS的发生与发展。