牙周病的治疗仍是临床难题。本课题组已开始了牙周干细胞的分离工作,由于牙周干细胞组织来源充分,临床易于推广应用。进一步的研究将是鉴定牙周干细胞的特性,并在小型猪模型上研究牙周干细胞体内功能及牙周组织再生机制,为其过渡到临床应用搭建桥梁。体外研究包括克隆形成率和Brdu法检测小型猪牙周膜干细胞的增值活性; RT-PCR法检测牙周膜干细胞的细胞表面标记物;免疫组化和Western Blotting法鉴定分化细胞的标记物及牙周膜成体干细胞在支架上形成的细胞外基质蛋白。体内研究包括组织学法观察小型猪牙周干细胞在不同支架上在体内形成矿化机制的能力;定量分析小型猪牙周膜干细胞-生物支架复合移植物自体牙周组织的再生能力。已有的研究及本项目研究有望获得维持牙周组织动态平衡和牙周组织再生的成体干细胞,并可能应用到牙周疾病的临床治疗。
牙周病是口腔临床的常见病,治疗棘手。本课题以小型猪做为实验动物,研究牙周干细胞体内功能及牙周组织的再生机制,探讨利用牙周膜干细胞介导修复牙周组织,为其过渡到临床应用搭建桥梁。首先在体外成功分离培养小型猪牙周膜干细胞,其克隆形成率为(1~23个/100000)。表达中胚层前体细胞标志物STRO-1(阳性率5.6%),Nestin(阳性率12.5%)及ALP(阳性率15%)。透射电镜下,牙周膜干细胞生长良好,能分泌大量细胞外基质。扫描电镜下,牙周膜干细胞在HA/TCP三维支架上生长良好。采用骨缺损加结扎丝线的方法建立小型猪实验性牙周炎模型。用牙周膜干细胞与HA/TCP三维支架材料混合后回植于小型猪实验性牙周炎骨缺损部位。用临床指标、影像学及组织病理学结果评价牙周组织修复效果。结果表明在牙周膜干细胞介导的治疗组,骨缺损回植处有大量新骨形成,牙周组织再生良好,治疗效果明显好于对照组。说明小型猪牙周膜干细胞复合HA/TCP有良好修复再生牙周骨缺损效果,有望应用于临床。另同时开展利用牙齿相关干细胞进行生物牙根再生研究,在小型猪上获得成功。还开展骨髓基质干细胞介导颌面部整形并治疗放射性骨髓炎等研究。