有效地防治蟑螂是急待解决的国际性重要课题。申请者分离了蟑螂非包含体病毒并进行了系统研究。该病毒基因组全核苷酸序列已经测定。申请者计划从研究组已有的东亚钳蝎毒素多肽cDNA克隆中,筛选专一作用于昆虫而对其它哺乳动物、甲壳类动物无毒性的蝎毒基因克隆,进一步选择其中对蟑螂作用强而相对来说对其它昆虫作用小的蝎毒素基因克隆,将得到的抗蟑螂蝎毒基因加上昆虫神经肽编码序列插入到蟑螂浓核PfDNV的全基因组克隆质粒中,通过将质粒直接转染或与野生型病毒的全基因组克隆共转染人工饲养黑胸大蠊若虫,得到具有实用价值和应用前景的基因工程蟑螂病毒。本研究对抗昆虫蝎毒素的转基因技术研究来说具有重要意义。
本研究的目的是首先表达、纯化东亚钳蝎(Buthus martensi Karsch)昆虫毒素基因BmKIT1蛋白和北非蝎毒基因AaIT蛋白。对其安全性、毒力进行研究,以评估其作为生物防治因子的应用潜力。其次,构建黑胸大蠊浓核病毒PfDNV表达载体,探讨该病毒作为表达载体在蟑螂体内表达外源基因的能力; 并将BmKIT1基因插入黑胸大蠊浓核病毒PfDNV基因组的特定部位,转染黑胸大蠊若虫制备重组的黑胸大蠊浓核病毒。 最后,通过对重组黑胸大蠊浓核病毒的药效实验和模拟现场实验,测试该重组病毒对黑胸大蠊的防治效果。