本研究在前期研究的基础上,以健脾益肾活血化瘀中药复方和糖尿病肾病发病密切相关的Gremlin基因为对象,综合运用蛋白芯片、RNA干扰、血清药理学、细胞培养等方法和技术。 通过对高糖培养的大鼠肾系膜细胞(RMCs)分别加以中药复方血清和慢病毒介导Gremlin RNAi作用,采用蛋白芯片分析中药复方作用RMCs、Gremlin-RNAi慢病毒感染RMCs、GFP示踪慢病毒阴性对照RMCs、高糖RMCs和正常RMCs组间蛋白表达谱的差异,开展蛋白组学研究,分析糖尿病肾病的分子作用机制,对于深入了解Gremlin在糖尿病肾病等并发症发病过程中的作用,发现确定糖尿病肾病的治疗靶点,深化对中药防治糖尿病肾病作用机制的研究,进而开发新型高效中药制剂,建立高效的DN干预方案,探索中西医结合的新方法和途径,进而为开发新型高效中药制剂奠定基础,均有重要意义。
DN;pathogenesis;Traditional Chinese medicine;protein chip;RNA interference
目的本研究在前期研究的基础上,研究以健脾益肾活血化瘀中药复方和糖尿病肾病发病密切相关的Gremlin基因对RMCs蛋白质组表达的影响。方法综合运用蛋白芯片、RNA干扰、血清药理学、细胞培养等方法和技术。通过对高糖培养的大鼠肾系膜细胞(RMCs)分别加以中药复方血清和慢病毒介导Gremlin RNAi作用,采用蛋白芯片分析中药复方作用RMCs、Gremlin-RNAi慢病毒感染RMCs、GFP示踪慢病毒阴性对照RMCs、高糖RMCs和正常RMCs组间蛋白表达谱的差异,开展蛋白组学研究。结果健脾益肾活血化瘀中药复方能显著改善RMCs GF-β1、VEGF、PDGF、CTGF、IL-6、MCP-1等蛋白的合成,减轻糖尿病肾病致病物质的累积,改善RMCs的功能。结论分析糖尿病肾病的分子作用机制,对于深入了解Gremlin在糖尿病肾病等并发症发病过程中的作用,发现确定糖尿病肾病的治疗靶点,深化对中药防治糖尿病肾病作用机制的研究,进而开发新型高效中药制剂,建立高效的DN干预方案,探索中西医结合的新方法和途径,均有重要意义。?