水稻粒形性状是衡量稻米外观品质的重要指标之一。本项目组以单片段代换系(SSSL)为材料,利用图位克隆法克隆了水稻粒宽的新基因Gw-8,其ORF总长为4717bp,含有3个外显子,编码区总长度为1368bp,编码455个氨基酸,编码一个未知的类似于SBP结构域的蛋白,同源搜索结果表明它可能是玉米tga1基因在水稻上的直系基因;RT-PCR和荧光实时定量PCR结果表明Gw-8基因具有时空和组织表达特异性,只在水稻穗部表达,穗长约9cm时表达量最大;构建了目的基因的正义表达载体pUbi::GW8、反义表达载体pUbi::Anti-GW8和启动子分析载体pGW8::GUS并通过农杆菌介导法转化到'华粳籼74'或'日本晴'中,获得了转基因苗;通过DNA测序及序列比较,发现Gw-8在不同来源的SSSL材料间存在8种单倍型的等位变异。水稻粒宽基因Gw-8 的克隆及等位变异鉴定将有助于从分子水平上进一步阐明水稻粒形遗传基础,为稻米品质分子育种奠定基础。
英文主题词rice; grain width gene; single segment substitution line; gene cloning;