小GTP结合蛋白是一类参与真核细胞各种基本生命活动的重要调控蛋白,对其在植物生长发育中的作用机理目前尚缺乏详尽的研究。Ran以及Ran结合蛋白是其中一类重要的调节蛋白,在动物细胞中的研究表明它们可能在细胞核与细胞质之间的物质转运和细胞分裂周期的调控中发挥着决定性的作用。本项研究以重要农作物小麦为对象,分离Ran结合蛋白基因,研究其表达特性,通过大肠杆菌体外表达系统表达并纯化Ran结合蛋白,制备相应的抗体,进一步通过免疫学、细胞定位、基因表达等结合基因瞬时表达和转基因植物研究Ran结合蛋白基因的作用、功能以及与植物生长发育和植物激素之间的关系,为揭示高等植物生长发育的调控机理,并在分子水平调控植物的生长发育奠定理论基础。
小GTP结合蛋白是一类参与真核细胞各种基本生命活动的重要调控蛋白,对其在植物生长发育中的作用机理目前尚缺乏详尽的研究。Ran以及Ran结合蛋白是其中一类重要的调节蛋白,可能在细胞核与细胞质之间的物质转运和细胞分裂周期的调控中发挥着决定性的作用。本项研究以重要农作物小麦为对象,首次分离了Ran结合蛋白基因,研究了其表达特性,以及分子进化特征。通过大肠杆菌体外表达系统表达并纯化了Ran结合蛋白,免疫结合实验表明它可以与Ran蛋白特异性的结合。细胞定位表明Ran结合蛋白主要定位在细胞核的核膜周围,与其调控物质运输有关。创建了正义及反义转基因烟草,分析表明Ran结合蛋白在烟草个体发育过程具有重要的调控作用,表现在对根的生长,对激素的反应,向重性以及蛋白质合成上。上述结果为揭示Ran结合蛋白的作用机理,并在分子水平调控植物的生长发育奠定了理论基础。