中文摘要：

表皮生长因子受体（EGFR）家族由四种对细胞生长、发育和分化起极其重要作用的受体酪氨酸激酶（RTK）类蛋白组成，它们的异常行为在癌症的发生和发展中起着非常关键的作用。HER2不但可自身或与EGFR家族其他蛋白形成同/异二聚体，而且对生长刺激信号的活化起着核心的作用，故研究针对它的基因治疗药物对了解癌细胞的生长、增殖以及调控均有十分重要的意义。本课题拟在以往对Her2/neu基因以及小干涉RNA（siRNA）研究的基础上，设计并筛选出能有效诱导Her2/neu基因转录后沉默的siRNA，然后利用本室已获得的具有HER2特异性结合活性的内吞型单链抗体，通过表达单链抗体-人精蛋白（PRM）融合蛋白，将siRNA定向输送至肿瘤细胞。本研究的成果不但可以为HER2诱发细胞癌化机理的研究提供强有力的工具，而且也将为找到一种新的更为有效的针对HER2过表达肿瘤的临床候选药物打下良好的基础。

结论摘要：

大约30％的乳腺癌中有表皮生长因子受体家族蛋白HER2的过表达，HER2表达水平与病人的预后以及恶性程度密切相关。RNA干涉（RNAi）是最近发展起来能特异性抑制哺乳动物细胞中基因表达的新技术。本研究在设计和鉴定出对HER2有良好RNAi效应的两个靶序列的基础上，构建了一系列U6启动子引导的小干涉RNA（siRNA）表达质粒，经LR重组反应获得了含siRNA表达盒的腺病毒及慢病毒载体并成功包装了病毒。病毒感染SKBR3后经荧光定量PCR、蛋白印迹杂交和流式细胞仪一系列实验证明腺病毒及慢病毒介导的RNAi确实能有效地下调肿瘤抗原HER2的表达，而且经病毒处理后细胞生长受到了抑制。我们的研究为进一步阐明HER2与癌症恶化的关系以及发展新的基因治疗药物提供了新的工具。