中文摘要：

目前临床上对于视网膜神经变性疾病尚无有效治疗方法。本项目在申请人对视网膜内层基因转染的前期研究基础上，探索视网膜外层电穿孔基因转染条件，设计完善的视网膜全层电穿孔模式，经视网膜下腔和玻璃体腔双途经注射辅助基因转染视网膜全层，了解基因转染情况并分析蛋白表达规律；再以视网膜色素变性疾病模型RCS大鼠作为研究对象，利用脑源性神经营养因子(Brain-derived Neurotrophic Factor，BDNF)具有对视网膜多种细胞广泛的保护作用的特点，在特定电穿孔模式下经双腔途经注射含有BDNF基因的pcDNA3.1/NT-GFP-TOPO质粒转染视网膜，探索内、外层联合转染BDNF基因对RP的治疗作用和有效时间窗。以期能从多级神经元网络的相互干预入手，着眼于早期阻断外层视网膜细胞凋亡并预先保护视网膜内层神经元，寻找和探索适宜的视网膜全层保护措施，为难治性视网膜疾病的临床治疗提供新思路。

结论摘要：

本项目通过尝试一系列的电刺激条件，探索出适合大鼠视网膜外层电穿孔基因转染的条件，实验发现，电穿孔模式下，经视网膜下腔注射的质粒可以转染到视网膜色素上皮细胞层，但较难进入感光细胞层。结合玻璃体腔内注射质粒在电穿孔下转染视网膜神经节细胞，未来可望通过玻璃体腔和视网膜下腔的双间注射，将具有保护效果的基因通过电穿孔的辅助转染视网膜神经节细胞和视网膜色素上皮细胞内，对于治疗视网膜色素变性类疾病提供一个潜在的治疗新方案。