中文摘要：

胶质瘤内的新生血管形成是个多因子共同参与的过程。因此，寻找新的血管调控机制并针对其设计更有效的治疗策略,已成为目前胶质瘤抗血管治疗的重要研究方向。我们在前期研究中发现，一种名为中介素的激素样多肽，以一种目前尚未阐明的新机制调控血管生长，其主要作用为促进血管成熟和正常化，改善血液灌流情况，并与VEGF有协同作用。我们进一步发现，中介素还与胶质瘤内的血管生长过程密切相关。因此，本项目即根据中介素的这种血管调控作用设计了两种胶质瘤治疗方案其一为直接阻断中介素以破坏血管结构，另一种则是利用其诱导肿瘤血管正常化的功能，与化疗药物联用以增强治疗效果。我们预期能找到一种在疗效上优于传统药物，并有临床应用前景的治疗方案。我们还期望能通过本项目的研究成果，阐明一条新的血管调控机制。目前，国际国内均无这一研究的相关报道，因此本课题具有很好的创新性和研究价值。

结论摘要：

颅内胶质瘤是对人类生命和健康危害较大的疾病。针对胶质瘤的基础研究的一个重要部分就是探索其新生血管形成的分子机制。我们在前期研究中发现，一种名为中介素的激素样多肽，以一种目前尚未阐明的新机制调控血管生长。因此，本项目即根据中介素的这种血管调控提出了胶质瘤的治疗假说并试图验证。 在本项研究中，我们为了对研究对象——中介素进行调控，首先通过Real time PCR筛选4条候选siRNA，发现siR-36653和siR-228213可有效抑制内皮细胞IMD表达；然后通过Western blot检测发现siR-228213抑制效果最明显，且证实siR-228213可显著抑制血管腔扩张。我们通过实验证实了在缺氧情况下，IMD在A172、C6、U251和内皮细胞中的表达明显升高；Fibrin beads assay体外血管生长实验显示，IMD可诱导血管形成具有等级结构的、形态正常的血管网络，进一步提示了IMD在肿瘤血管生成中的靶向特征。为了弄清楚IMD在血管生成作用中的内在机制，我们进行了血管内皮细胞的检测。结果发现第一个可能的通路是IMD诱导内皮细胞Akt磷酸化——使用Akt通路抑制剂Wortmannin可抑制IMD的血管活性。第二个可能的通路是通过ERK1/2信号通路发挥作用。这是因为WB检测发现IMD可诱导内皮细胞ERK1/2磷酸化，使用ERK抑制剂PD98059可有效抑制IMD的血管活性。IMD诱导血管生成的第三个机制可能是通过作用于内皮细胞表面的CRLR/RAMP2受体复合物而产生的作用。因为我们RT-PCR检测发现内皮细胞中只表达RAMP2，而不表达RAMP1和RAMP3。用siRNA沉默RAMP2后，IMD不能诱导Akt磷酸化。沉默RAMP2后，IMD不能诱导EKR1/2磷酸化。沉默RAMP2后，IMD不能限制血管出芽。沉默RAMP2后，IMD不能促使血管腔扩张。对肿瘤团块而言，IMD通过促进肿瘤血管正常化增加血供。而动物实验也从另一个侧面证实了阻断IMD可通过减少肿瘤血供而抑制肿瘤生长。 总的看来，我们通过本项研究证实了原有的假说IMD在缺氧表达下上调，促进胶质瘤血管正常化，通过增加血供而促进胶质瘤生长；阻断IMD可减少肿瘤血供，从而抑制胶质瘤生长。本研究将为胶质瘤的抗血管生成靶向治疗提供一个可能的方向。