中文摘要：

抗体改形是进行抗体人源化的一种策略，一直是抗体工程研究的热点之一。我们将核糖体展示技术与DNA 改组技术（DNA shuffling 技术）结合，设计了一种用于抗体改形的体外分子定向进化新策略，从一个由大量突变体组成的改形抗体库中筛选改形抗体。与采用噬菌体展示等体内筛选技术的体内分子定向进化策略相比，该策略的整个过程完全在体外进行，不需经过细菌转化的步骤，操作简便、快捷，尤其适于进行大容量改形抗体库（≥1014）的筛选。该策略具有相当的独创性，有可能在抗体改形中广泛应用。 4-1BB辅刺激信号主要作用在T细胞活化的后期，具有长期持续活化T细胞的功能。激动活性的抗4-1BB抗体可以代替4-1BB配体，提供辅刺激信号，协同第一信号激活T细胞。本研究采用前述体外分子定向进化策略，成功进行了激动活性鼠源抗4-1BB单链抗体（4B4-1 scFv）的改形。并构建了两种三特异抗体（抗CEA-抗CD3-抗CD28三特异抗体、抗CEA-抗CD3-抗4-1BB三特异抗体）和一种四特异抗体（抗CEA-抗CD3-抗CD28-抗4-1BB四特异抗体），将在进一步的实验中进行检验其体内，体外肿瘤杀伤活。