中文摘要：

应用RNA干扰（RNA interference,RNAi）技术对利用基因芯片技术筛选出的肝细胞癌转移基因骨桥蛋白（osteopontin,OPN）进行体外、体内功能研究，进一步明确其在肝癌转移中的作用。然后应用基因芯片技术分析骨桥蛋白功能实验前后肝癌肿瘤细胞、组织中基因表达谱的变化，并用酵母双杂交系统筛选与骨桥蛋白相互作用的蛋白，探讨骨桥蛋白在肝癌转移中的信号通路和作用机制。同时回顾性、前瞻性研究骨桥蛋白在大量肝癌病人肿瘤组织、血清和尿液中的表达水平及其与肝癌转移复发及病人预后间的关系。通过上述研究，探讨骨桥蛋白调控肝癌转移潜能的途径及其作为肝细胞癌转移预测诊断指标的可行性。

结论摘要：

[摘要] 目的探讨应用RNA干扰、基因芯片等技术降低细胞内骨桥蛋白（OPN）表达水平对人肝癌细胞侵袭转移能力的影响及其相关途径，研究肝癌病人血清骨桥蛋白表达水平与肝癌转移、预后关系，探讨OPN作为肝癌转移预测、诊断指标可行性。方法体外化学合成OPN序列特异性双链RNA，转染高转移肝癌细胞株LM3，用Real Time PCR、Western blot 检测OPN表达，克隆形成、细胞侵袭实验和裸鼠肿瘤生长和肺转移情况观察肝癌细胞恶性生物学行为改变。用ELISA法检测肝癌病人血清OPN表达水平及其与肝癌转移复发的关系。结果与对照组相比，转染特异性siRNA后肝癌细胞OPN mRNA和蛋白表达水平显著降低（分别降低79%和90%），细胞克隆形成和穿过人工基底膜数目明显减少（P=0.005，P=0.001）；裸鼠肿瘤生长速度和成瘤率显著降低(P<0.01)，肺转移灶形成数目明显减少(P<0.01)。血清高OPN者转移复发率明显增高（P=0.0013）。结论特异性siRNA可显著降低OPN表达并显著抑制肝癌细胞的侵袭转移能力，血清OPN表达水平与肝癌转移、预后密切相关，可作为预后指标。