TGF-beta通路影响着细胞的诸多生理活动,如增殖、分化、凋亡和胞外基质合成等。我们前期研究结果揭示,胃癌患者样本中MAWD的表达量较对应的癌旁组织明显下调。而且,我们还观察到,它的结合蛋白质MAWBP (MAWD binding protein)的表达量显著下降且两者具有显著的相关性。尽管,MAWBP的研究尚在早期阶段,但是有关其结合蛋白MAWD(putative human MAPK activator with WD repeats)的研究相对较多,已知它是抑制TGF-beta通路活化的一个重要蛋白质。我们假设,MAWBP可能通过和MAWD的相互作用对TGF-beta信号通路产生影响。为此,我们将通过构建高表达和RNAi的细胞模型,研究MAWBP/MAWD复合体对TGF-beta通路活性的调控,以及该通路的改变对胃癌细胞生物学行为的影响。
TGF-beta signaling pathway;MAWD;MAWBP;complex;
本项目研究发现,MAWBP/MAWD复合体对胃癌细胞的各种生理学行为有着重要的影响,进一步研究则揭示该种影响可能通过TGF-beta通路来进行。首先,我们确定,在胃癌细胞系BGC823中确实存在MAWBP/MAWD复合体。然后通过构建高表达和RNAi稳定细胞株,利用MTT、transwell、划痕实验、流式细胞仪等方法,发现MAWBP/MAWD复合体形成与否对细胞的增殖、侵袭、迁移和凋亡能力都有着影响。再运用Western Blot、组织化学、IP等方法研究发现,这种对胃癌细胞生物学行为的影响,与TGF-beta通路的活性变化有很强的关联性。该复合体可以调控该通路下游成员,如Smad家族成员的活性,影响其入核,从而导致细胞行为的变化。