中文摘要：

转移是肺癌病人死亡的主要原因，是肺癌治疗的难点。肿瘤"Self-seeding"理论认为发生转移的肿瘤细胞能回到原发癌组织定植，并促进原发肿瘤生长。但其具体机制尚不清。我们前期研究表明Fascin1能够促进肺癌迁移、侵袭，在肺癌转移中起重要作用。结合"Fascin1在"Self-seeding"过程中对肿瘤细胞渗透进入原发肿瘤起重要作用"的新发现以及"Fascin1活性受细胞外基质调控"的研究结果，我们推测Fascin1能够促进肺癌发生"Self-seeding"；其可能通过直接促进肺癌细胞迁移、侵袭，以及受原发肿瘤细胞外基质调节继而增强肺癌细胞粘附两种机制，双向促进"Self-seeding"发生。本项目拟采用小动物活体成像技术、基因重组技术、流式细胞技术等检测Fascin1在肺癌"Self-seeding"中的作用，研究其作用机制，为防治肺癌发生及转移提供新的研究思路和治疗靶点。

结论摘要：

转移是肺癌病人死亡的主要原因。尽管目前对于肺癌转移进行了大量的研究，但是尚缺乏有效的防治方法。肿瘤的Self-seeding理论认为发生转移的肿瘤细胞能回到原发癌组织定植，并促进原发肿瘤生长，但其机制并不清楚。研究显示Fascin是乳腺癌等肿瘤发生Self-seeding过程中一个重要的调控基因。我们前期研究也显示Fascin能够促进肺癌细胞迁移和侵袭。但是其在肺癌Self-seeding中的作用尚不清楚。为了进一步研究肿瘤Self-seeding理论在肺癌中的情况以及Fascin在肺癌细胞Self-seeding中可能的作用，我们在本课题实施过程中（1）完成了不同载体标记的肺癌A549细胞株的建立，最终确定了适合进行小动物体内活体成像的携带嘌呤霉素（Puromycin，Puro)抗性基因的绿色荧光蛋白GFP和荧光素梅Luciferase （Luc）双标记腺病毒载体，并转染A549细胞，建立了A549-Lenti-GFP-Luc-Puro细胞株，通过“对侧种植”实验，证明在肺癌中存在Self-seeding现象，但是其Self-seeding现象发生率远低于其他肿瘤细胞，尚需进一步实验证实；（2）同时，我们采用体外实验的方法，过表达Fascin后，检测了Fascin对于肺癌细胞生物学特性的影响，证明Fascin能够促进肺癌丝状伪足形成，具备了探知远隔信号的基本细胞结构，丝状伪足；而Fascin对于肺癌细胞的上皮间质转化则无影响，提示Fascin在肺癌Self-seeding过程中可能主要参与了向原发肿瘤的转移过程而并没有参与其离开肿瘤的过程；（3）随后，我们检测了Self-seeding相关细胞因子对Fascin过表达肺癌细胞的影响，通过划痕实验及Transwell侵袭实验证明，IL-6能够促进肺癌细胞，特别是高表达Fascin的肺癌细胞的迁移和侵袭。以上实验结果为进一步研究肺癌Self-seeding过程奠定了一定的实验基础，同时也为将来肺癌转移的防治提供了新的思路。