结合现代神经科学最新研究进展,在中医络病理论指导下,运用中药药理学方法、新生大鼠薄层器官型脑片神经干细胞分离、培养与荧光免疫双标、PCR等分子生物学技术,创立器官型脑片缺血再灌注模型神经干细胞培养鉴定技术,观察通心络鼠血清、脑脊液(不同剂量)对体外分离培养的薄层器官型脑片缺血再灌注模型神经干细胞增殖分化及相关细胞因子的影响,通心络(不同剂量)对大鼠脑缺血及再灌注后不同时间、脑内不同部位神经干细胞增殖分化及已知与NSC增殖分化相关细胞因子的影响;阐明通心络促进脑缺血损伤后神经功能恢复的机制,明确脑缺血损伤后脑内神经干细胞的生长、迁徙、分化及相关细胞因子的表达。对验证发展中风"毒损脑络"学说,研究通心络治疗脑梗塞机理,及中西医学术交流具有重要意义。
本研究结合现代神经科学最新研究进展,在中医络病理论指导下,运用中药药理学方法、新生大鼠薄层器官型脑片神经干细胞(NSCs)分离、培养与荧光免疫双标、PCR等分子生物学技术,改进了线栓法大鼠脑缺血再灌注的制作,创立器官型脑片缺血再灌注模型NSCs培养鉴定技术,观察了通心络鼠血清(不同剂量)对体外分离培养的薄层器官型脑片缺血再灌注模型和大鼠胚胎NSCs增殖分化及相关细胞因子的影响,通心络(不同剂量)对大鼠脑缺血及再灌注后不同时间、脑内不同部位神经干细胞增殖分化及已知与NSC增殖分化相关细胞因子的影响。取得以下成果1、以头皮针导引线栓制作的模型具有具有操作简单;术中出血少,术野清晰,成功率高的特点,通心络对此模型大鼠内源性NSCs的增殖分化具有显著的促进作用,可持续至第30天,并能诱导细胞因子EGF、b-FGF、IGF-1、EPO、VEGFmRN的表达;以大剂量组作用更为明显 ;2、通心络对新生大鼠器官型脑片缺血再灌注损伤模型和大鼠胚胎NSCs的增殖分化有明显促进作用;3、通心络对脑缺血损伤后内源性神经干细胞增殖分化的最佳干预时间应在发病第14天内,恢复期治疗当以补肝肾、解毒通络为法。