中文摘要：

本研究的目的为克隆HBV 抗原特异性细胞毒T 淋巴细胞（CTL）的T 细胞受体（TCR）编码基因，通过转基因表达产生HBV 抗原特异性CTL，进而在细胞水平研究特异性CTL 的作用与机制。本项目取得了以下结果1)通过大样本分析阐明了我国各病程乙肝患者感染HBV的特异性CTL表位变异特点；2)创建了高效扩增HBV特异性CTL和TCR编码基因的方法，创建了利用血清痕量DNA进行HLA-A2分型的技术；3) 从HLA-A2阳性急性乙肝恢复期患者外周血中诱导、分选、克隆和扩增HBV 抗原特异性CTL；4)提取细胞RNA，用RT-PCR 和5'-RACE 等方法获取了TCR alpha 和beta 链编码基因，包括从2例急性乙肝患者获取了3对单细胞来源的配对TCR基因；5)构建了TCR 重组逆转录病毒载体，介导特异性TCR 在HLA-A2 阳性人 T 细胞上获得了一定水平的表达。本研究的主要创新在于创建了通过建立短期CTL细胞系克隆单细胞来源TCR編码基因的方法，为研究特异性CTL建立了基础。本研究将在进一步提高TCR转基因表达水平的基础上，分析重组表达特异性TCR 的CTL 作用与机制。