通过互补克隆得到了5.5kb的DNA片段,其中约1.2kb的DNA序列是一个完整的开放阅读框(ORF),称为sawF基因。该基因是圈卷产色链霉菌形态分化过程中的关键基因。它在气生菌丝发育成孢子的过程中起重要作用。初步研究结果表明,sawF编码的蛋白产物含有约400个氨基酸。推测该基因产物为转录调控因子。本申请拟从转录调控,时空表达,基因间相互作用等方面对sawF进行研究,从分子水平揭示该基因的结构与功能的关系以及该基因在分化中的调控机制。
完成了与尼可霉素生物合成和形态分化相关调控基因-sawF(现命名为sanG)的克隆、DNA序列分析及其功能研究。sanG基因的阻断导致突变株失去了尼可霉素的产生能力,同时圈卷产色链霉菌的发育分化停止在气生菌丝阶段,呈现白颜色的表型;不能形成灰色的孢子链(spore chains)和成熟孢子。转录研究表明,sanG具有三个转录起始位点 (P1, P2和P3), P1的转录与尼可霉素的生物合成和形态分化有关。SanG特异性地调控sanO-V和sanN-I的转录单元,是圈卷产色链霉菌尼可霉素生物合成和发育分化中的一个正调控基因,有关结果已在微生物学领域顶级杂志(Mol. Microbiol., 55: 1855-1866, 2005)上发表。 为进一步研究SanG的作用机制,我们成功地删除了SanG作用的靶基因,获得的突变株缺失了尼可霉素产生的能力, 同时不能正常发育分化。克隆了ArpA类的调控基因-sabR(Streptomyces ansochromogenesγ-butyrolactone receptor)。sabR正调控尼可霉素的产生,对形态分化的调控则与其所利用的碳源有