中文摘要：

以人类乳腺癌细胞株MCF-7为实验对象，利用重组腺相关病毒介导的含Tet-On调控元件的HSVtk/GCV自杀基因系统对该细胞株进行杀伤性试验，并利用基因芯片、RT-PCR、Western Blotting等手段对该系统对乳腺癌细胞杀伤作用的分子机理进行了探讨。发现rAAV+Dox+GCV组的细胞相对其他各组细胞，S期的细胞显著增多(P<0.05)，表明该系统干预乳腺癌细胞后，细胞周期S期受阻。处理组细胞相对与其他各处理组细胞上调基因246个，下调基因64个，其中与DNA复制、DNA损伤与修复相关的基因比较多。RT-PCR验证显示p21表达显著上调，而PCNA表达显著下调，与芯片结果一致。进一步研究发现，处理组的p21蛋白表达量上调，而PCNA、Cdk1、Cdk2、Cyclin B等蛋白表达量下调；而p53及磷酸化p53（Ser6）的表达在组间无差异。HSVtk/GCV自杀基因系统对乳腺癌细胞MCF-7的杀伤作用可能是通过非p53依赖性的途径上调p21的表达，进而导致PCNA、Cyclin B、CDK1、CDk2等在细胞内的含量降低，使细胞周期受阻，并最终导致乳腺癌细胞死亡。