中文摘要：

效应机制未明及潜在安全隐患是间充质干细胞（MSC）应用于治疗急性移植物抗宿主病（aGVHD）的瓶颈所在。新近发现，细胞间能通过释放微粒（MP）传递分泌型miRNA，高效调控靶细胞基因表达。MSC来源的MP包裹有大量miRNA分子，结合MSC作用特点及前期研究，我们推测负载分泌型miRNA集群的MP是MSC治疗aGVHD的重要效应器。本课题拟体外证明MSC-MP通过传递miRNA集群等机制发挥免疫抑制作用，并研究调控MP内容物组装的因素及其分子机制；构建aGVHD模型，观察阻断MP释放对MSC疗效的影响，同时探讨直接输注MSC-MP对小鼠aGVHD的治疗效应，证明MP是MSC的重要效应器。本课题的完成，将进一步阐明MSC的作用机制,并可能基于MP建立一种评判MSC体内疗效的良好指标，更为重要的是，MP有望发展为一种规避MSC隐患的新型治疗手段，为突破MSC的临床应用瓶颈提供潜在策略选择。

结论摘要：

本课题拟通过分离、提取、鉴定间充质干细胞（MSC）来源微泡(MV)，分析MSC-MV是否具有免疫调节作用用以调控移植物抗宿主病(GVHD)。首先，我们在全骨髓贴壁法的基础上，探讨一种改良后简便而高效的人骨髓间充质干细胞培养方法；对改良方法所获得的MSC进行鉴定，并与传统全骨髓贴壁法进行比较。结果提示新的MSC分离方式在换液、消化时间方面具有明显优势，是一种新型、可靠的MSC提取方式。在此基础上，我们进一步分离、提取、鉴定了MSC-MV，结果发现尽管MSC-MV能够与T细胞结合，但对T细胞抑制作用不明显，可能不存在课题立题中原先设计的抗GVHD作用，后将立题改为MSC-MV对造血干祖细胞（HSPC）的支持作用，探讨MSC-MV能否应用于体外脐血（CB）扩增体系中提高CB中HSPC数量。我们在研究中发现，MSC-MV包含支持造血功能的小RNA（miRNA）。我们将MSC-MV加入CB体外扩增体系中，发现MSC-MV能显著提高脐血来源的单个核细胞和CD34阳性细胞数量，并提高原始祖细胞的数量，其机制是通过MSC-MV中miRNA诱导脐血造血干细胞中自我更新信号如β-catenin等上调，诱导脐血HSPC扩增，并能保持干细胞表型。以上结果提示MSC-MV具有支持造血的功能，可能成为一种新的脐血扩增手段。本课题目前已完成两篇博士论文，相关论文正撰写及发表中。