中文摘要：

NF-kB持续/过度活化所致的失控性炎症反应被认为是脓毒症和MODS形成的根本原因，抗炎治疗已成为处理这些疾病的基本策略，其中以NF-kB为抗炎靶点的研究更成为研究的热点。根据目前在拮抗失控性炎症反应不足之处以及抑制NF-kB活化策略方面的空白点，我们在国家自然科学基金（30170367）的资助下，设计合成了高效特异拮抗NF-κB转录活性，具有抗炎功能的肽核酸。为了解决肽核酸胞内转运和细胞靶向问题，本项目欲以已设计合成的肽核酸为先导物，重新进行分子设计，将Tat穿膜肽、胞内蛋白酶QPP特异酶切位点与高效拮抗NF-κB转录活性的肽核酸融合，通过膜转运实验和体内外功能鉴定，最终获得靶向NF-κB并具有穿膜功能和"靶向效应性"的新型抗炎肽核酸，这将为靶向NF-κB的抗炎圈套肽核酸向临床研究过渡铺平道路，同时为亲水性多肽、核酸、中性PNA等药物胞内转运探索出一条新途径，为新药设计开创一条新思路。

结论摘要：

NF-kB持续/过度活化所致的失控性炎症反应被认为是脓毒症和MODS形成的根本原因，抗炎治疗已成为处理这些疾病的基本策略，其中以NF-kB为抗炎靶点更成为目前的研究热点。因此，我们以NF-kB圈套核酸为特异拮抗NF-kB转录活性的先导核酸分子。在此先导拮抗核酸的基础上，本项目首先设计、合成包含NF-kB顺式作用元件半环状的单链寡聚锁核苷酸分子（LNA），Biosensor实验证实LNA可高亲和力与NF-kB结合。体外EMSA实验证实LNA对NF-kB DNA结合活性有抑制效应。随后用硫醇标记LNA，并与穿膜肽以二硫键形式形成融合分子。细胞穿膜实验证实，穿膜拮抗LNA能高效进入细胞，并能高效抑制LPS诱导的THP-1细胞炎症介质TNF-a和IL-6蛋白和mRNA的表达以及TNF-a刺激的Hela细胞NF-kB反应性报告基因Luc的表达。穿膜LNA治疗酵母多糖A诱发的小鼠腹膜炎实验，结果表明穿膜LNA能有效改善小鼠腹膜炎的局部炎症反应。这些结果证实新型NF-kB穿膜圈套LNA能高效抑制NF-kB的活化，并具有高效抗炎功能。本项目的完将为靶向NF-kB圈套核酸分子走向临床应用打下坚实的基础。