中文摘要：

我们从建立的用于筛选胃癌下调基因的抑制消减杂交cDNA文库,利用RACE（快速cDNA末段扩增）技术克隆到胃癌下调或缺失的低丰度全长新基因,命名为GDDR(AF494509),并发现胃癌组织的GDDR基因有多点突变发生。初步实验表明GDDR能显著抑制胃癌细胞的生长,GDDR与我们从该文库中克隆到并已被我们证明的,另一胃组织特异,胃癌下调的新候选抑癌基因CA11为同一BRICHOS家族-人类存在的又一崭新的保守的BRICHOS蛋白家族,GDDR在染色体上紧邻CA11,二者均在2p13.3。近来GenBank已正式公布GDDR为2p13.3上胃癌下调基因(NM 182536)。本研究欲进一步揭示GDDR的特性及功能作用; GDDR及其突变在胃癌发生、发展中的作用;明确GDDR及其突变在癌前病变至癌演变过程中的作用;GDDR抑制作用的组织细胞特异性;阐述染色体2 p13 在胃癌发生发展的重要位置

结论摘要：

本研究以申请者克隆得到的一种在胃癌中下调或者缺失表达的新基因GDDR为研究对象，揭示该基因的特性及功能作用。首先，我们对GDDR基因特点进行了分析，并主要通过多组织的Northern blotting明确了GDDR基因在胃肠道的特异性表达，为了明确GDDR基因的亚细胞定位，构建了EGFP 真核细胞荧光蛋白融合表达系统，验证了GDDR基因蛋白产物的分泌特性；第二，构建了真核及原核表达载体，对GDDR基因进行表达，收集蛋白产物免疫家兔制备多抗；第三，将GDDR 克隆入真核表达系统，建立了稳定转染细胞，利用MTT 检测方法和流式细胞仪检测了GDDR 基因表达对肿瘤细胞周期和增殖的影响，结果表明GDDR 基因表达可以抑制肿瘤细胞增殖及引起细胞的周期阻滞；第四，收集胃癌组织，癌旁组织，正常胃组织及转移胃癌组织标本,提取RNA，RT-PCR，克隆至测序载体测序,鉴定GDDR基因的突变。 通过上述研究，明确了GDDR基因的分布表达特性，对GDDR基因的生物学功能进行了比较全面的观察，GDDR基因蛋白产物的获取及抗体的制备为后续的基因功能研究提供了有效的工具。